PDA

View Full Version : Phương pháp PCR



phamvanhoa
03-08-2013, 17:27
vag thưa a tuấn là e cũng có đọc ở 1 số trang khác thì có rất nhiều thông tin khác nhau nói về thời gian có thể xét nghiệm PCR, e đã làm PCR ở tuần thứ 3, a có thể giải thích kỹ cho e về pp này dc k ạ, nó là tìm kháng nguyên hả a

joolee91
03-08-2013, 17:52
PCR (Polemerase Chain Reaction, phản ứng chuỗi polymerase) là một kỹ thuật nhằm tạo ra một lượng lớn bản sao DNA mục tiêu trong ống nghiệm dựa vào các chu kỳ nhiệt.

Về lý thuyết là có thể phát hiện HIV ở giai đoạn sớm (thời kỳ cửa sổ) với phương pháp trực tiếp bằng các kỹ thuật:

Phân lập virus bằng nuôi cấy tế bào.
Phát hiện kháng nguyên virút trong máu
Tìm chất liệu di truyền (ARN và ADN provirus) của virút HIV, bằng kỹ thuật PCR (Polymerase Chain Reaction). Xét nghiệm PCR được sử dụng trong:

Chẩn đoán nhiễm HIV ở trẻ sơ sinh, con của người mẹ nhiễm HIV: Xét nghiệm lúc 2 tháng và 6 tháng, nhưng phải làm lại lúc 9, 12, 18 tháng tuổi.
Chẩn đoán nhiễm HIV ở giai đoạn sớm, có thể thực hiện khoảng 2 tuần sau khi có hành vi nguy cơ. Tuy nhiên, xét nghiệm này chỉ đóng vai trò định hướng, không mang giá trị khẳng định có nhiễm và chưa có hướng dẫn từ Bộ Y Tế.

Nếu bị nhiễm HIV, bác sĩ sẽ cho bạn thuốc uống nhằm giữ virus HIV ở mức có thể kiểm soát được, từ đó duy trì miễn dịch của cơ thể chống lại các bệnh cơ hội.

phamvanhoa
03-08-2013, 20:07
và cho e hỏi thêm đó là e muốn làm xét nghiệm nữa thì xét nghiệm bằng pp j hả a, e dc 10 tuần rồi, e muốn xét nghiệm 1 lần nữa thôi e sợ đi xét nghiệm lắm, e phải xét nghiệm ở thời gian bao nhiêu để biết chắc chắn và k phải đi xét nghiệm lần nào nữa

Tuanmecsedec
03-08-2013, 20:50
vag thưa a tuấn là e cũng có đọc ở 1 số trang khác thì có rất nhiều thông tin khác nhau nói về thời gian có thể xét nghiệm PCR, e đã làm PCR ở tuần thứ 3, a có thể giải thích kỹ cho e về pp này dc k ạ, nó là tìm kháng nguyên hả a

PCR (Polymerase Chain Reaction - Phản ứng chuỗi trùng phân) là một kỹ thuật then chốt trong di truyền học phân tử cho phép phân tích bất kỳ một đoạn ngắn nào của chuỗi ADN (hay của chuỗi ARN) mà không phải nhân dòng vô tính đoạn ADN đó. PCR được sử dụng để tái tạo (khuếch đại) những đoạn ADN chọn lọc. Trước đây, việc khuếch đại này được thực hiện nhờ những vi khuẩn và phải mất hàng tuần. Nhưng giờ đây với kỹ thuật PCR được thực hiện trong các ống nghiệm thì chỉ mất một vài giờ. PCR hiệu quả cao đến nỗi có thể tạo ra vô số bản sao của ADN. Ngoài ra, PCR sử dụng chính những phân tử mà thiên nhiên sử dụng để sao chép ADN:
- Hai "phân tử mồi" để đánh dấu vị trí bắt đầu và kết thúc của chuỗi ADN cần sao chép.
- Một enzym có tên là polymerase (enzyme đồng phân hóa) chạy dọc theo đoạn ADN đó, đọc mã của ADN và lắp ráp nên một bản sao của ADN.
- Rất nhiều khối bazơ mà polymerase sử dụng để xây nên bản sao của ADN.
Một ưu điểm khác của PCR trong chẩn đoán bệnh nhiễm khuẩn là PCR chẳng những có thể phát hiện được tác nhân vi sinh vật gây bệnh trực tiếp trong bệnh phẩm mà còn có thể phân loại type di truyền của các vi sinh vật này, không cần phải nuôi cấy được vi khuẩn. Ðây là một đóng góp rất lớn trong nghiên cứu dịch tễ học tìm hiểu mối liên quan của các tác nhân gây bệnh trong cộng đồng. Một chứng minh hết sức nỗi tiếng trong ứng dụng này là trường hợp "nha sĩ Florida" (Florida dentist) : Nhờ có PCR mà người ta đã xác định được 3 bệnh nhân khám điều trị răng đã bị nhiễm HIV từ một nguồn gốc là vị nha sĩ nọ bị nhiễm HIV.
Do thử nghiệm PCR quá nhạy cảm, nên khi áp dụng trong chẩn đoán, một vấn đề rất quan trọng cần phải lưu tâm, đó là hiện tượng dương tính giả, chủ yếu là do mẫu thử bị nhiễm bởi các sản phẩm PCR trước đó. Chỉ cần mẫu thử bị nhiễm một hoặc vài mảnh sản phẩm PCR thì các mảnh này sẽ được khuếch đại và mẫu cho kết quả dương nhưng là dương giả. Đợi 12 tuần là cần thiết. Việc gì mà vội hả bạn ?

Hiện nay xét nghiệm DNA_ PCR(Chuỗi phản ứng polymerase) là một trong những xét nghiệm có độ chính xác cao nhất tuy nhiên thời gian chính xác để thực hiện xét nghiệm này từ ngày có hanh vi nguy cơ vẫn còn gây nhiều tranh cãi (theo các tài liệu nước ngoài là 28 ngày,một số tài liệu của VN là 10 ngày hoặc theo một số bác sĩ của viện Pasteur là từ 3-7 ngày). Đây là một xét nghiệm khá tốn kém và quy trình khá phức tạp( dựa trên kĩ thuật nhiệt) nên thường chỉ dùng cho trẻ em(dưới 18 tháng tuổi) để phát hiện bản sao bộ ADN của HIV.Như Hiện tại theo mình biết viện Pasteur TPHCM dùng phương pháp này để xét nghiệm cho trẻ em dưới 18 tháng tuổi hoặc dùng đo nồng độ vi rút cho người có HIV.Viện Pasteur TPHCM nếu xét nghiệm PCR âm tính ( dưới ngưỡng cửa phát hiện) thì Bác Sĩ vẫn khuyên sau 12 tuần xét nghiệm lại.

phamvanhoa
03-08-2013, 22:06
a tuấn ơi trả lời cho e câu hỏi thứ 2 đi

fan2013
04-08-2013, 00:49
10 tuần thì bạn dùng pp gì cũng được, nếu âm bạn đã về đich 99,99999999999999999999%

Tuanmecsedec
04-08-2013, 09:24
a tuấn ơi trả lời cho e câu hỏi thứ 2 đi

Đã 10 tuần,bạn làm phương pháp gián tiếp tìm kháng thể : Test nhanh hoặc ELisa.

phamvanhoa
04-08-2013, 12:07
vâng a cho em 1 cái mốc thời gian để chỉ phải xét nghiệm 1 lần nếu kết quả là âm tính thì e k phải xét nghiệm lần nào nữa, vì e thấy mọi người trên diễn đàn toàn hỏi là e xét nghiệm ở thời gian này an tâm dc chưa, e sợ đi xét nghiệm lắm, e sẽ cố đợi đến khi chỉ phải đi xét nghiệm cuối cùng 1 lần nữa thôi

Nguyen Ha
04-08-2013, 13:59
vâng a cho em 1 cái mốc thời gian để chỉ phải xét nghiệm 1 lần nếu kết quả là âm tính thì e k phải xét nghiệm lần nào nữa, vì e thấy mọi người trên diễn đàn toàn hỏi là e xét nghiệm ở thời gian này an tâm dc chưa, e sợ đi xét nghiệm lắm, e sẽ cố đợi đến khi chỉ phải đi xét nghiệm cuối cùng 1 lần nữa thôi

Theo khuyến cáo của Bộ Y Tế là xét nghiệm lần cuối sau 12 tuần từ khi có nguy cơ.