Theo một số thông tin trên mạng, thì xét nghiệm H theo pp PCR có thể phát hiện sớm H từ 14-21 ngày sau nguy cơ. Em xin hỏi các anh chị thông tin có chính xác không và nơi nào thực hiện đc loại xét nghiệm này. Cảm ơn các anh chị.
Theo một số thông tin trên mạng, thì xét nghiệm H theo pp PCR có thể phát hiện sớm H từ 14-21 ngày sau nguy cơ. Em xin hỏi các anh chị thông tin có chính xác không và nơi nào thực hiện đc loại xét nghiệm này. Cảm ơn các anh chị.
Trích dẫn:
Gửi bởi noiloconmai
KỸ THUẬT REAL-TIME PCR
TRONG ĐỊNH LƯỢNG HIV-1 RNA
Trần Chí Thành, Trần Tôn, Trương Thị Xuân Liên
Viện Pasteur thành phố Hồ Chí Minh
Tóm tắt
Định lượng vi rút HIV trong máu là một thông số quan trọng trong chỉ định và theo dõi điều trị cũng như trong chẩn đoán sớm nhiễm HIV ở trẻ sơ sinh.
Trên thị trường đã có nhiều bộ sinh phẩm dùng để xác định số lượng vi rút HIV trong máu. Tuy nhiên việc sử dụng còn tương đối hạn chế nhất là ở các nước đang phát triển do giá thành cao và một số sinh phẩm chỉ có hiệu suất tốt đối với HIV-1 týp B lưu hành chính ở châu âu và Bắc Mỹy4 ANRS Cơ quan quốc gia nghiên cứu về Sida và các vi rút viêm gan của Cộng Hòa Pháp (ANRS) đã nghiên cứu và phát triển bộ kit Generique với giá thành thấp do sử dụng kỹ thuật real-time PCR và có hiệu suất cao với hầu hết các thứ týp di truyền của HIV-1 do thiết kế các mồi và mẫu dò trên vùng gen LTR (Long Terminal Repeats) có tính bảo tồn cao giữa các thứ týp di truyền của HIV-1.
Mục tiêu:
Nghiên cứu triển khai và đánh giá khả năng sử dụng bộ kit Generique trong định lượng HIV-1 tại phòng xét nghiệm HIV/AIDS của Viện Pasteur TP. HCM nhằm phục vụ chẩn đoán theo dõi số lượng vi rút HIV-1 trong máu cho bệnh nhân nhiễm HIV trong điều trị bằng ARV và chẩn đoán sớm nhiễm HIV cho trẻ (<18 tháng tuổi) có mẹ bị nhiễm HIV.
Vật liệu và phương pháp:
114 mẫu máu trẻ (<18 tháng tuổi) bao gồm 58 mẫu có HIV-1 DNA dương tính và 56 mẫu âm tính HIV-1 DNA.
10 mẫu huyết tương chuẩn của tổ chức ANRS (Pháp) và 20 mẫu huyết tương chuẩn của tổ chức NIH (Hoa Kỳ) dùng để kiểm tra chất lượng từ bên ngoài (External Quality Assurance)
Tất cả các mẫu được tiến hành định lượng HIV-1 RNA bằng bộ kit Generique và theo đúng quy trình chuẩn do bộ kit hướng dẫn và được thực hiện trên hệ thống máy realtime PCR ABI 7500.
Kết quả:
Tất cả 56 mẫu âm tính HIV-1 DNA thì không phát hiện HIV-1 RNA trong huyết tương bằng kỹ thuật realtime.
Tất cả 58 mẫu dương tính HIV-1 DNA thì đã phát hiện và xác định được số lượng HIV-1 RNA trong huyết tương.
Kết quả phản hồi từ 2 tổ chức ANRS và NIH về kết quả định lượng các bộ mẫu huyết thanh chuẩn, các giá trị về số lượng bản mẫu HIV-1 RNA (giá trị tuyệt đối, giá trị log) đều không khác biệt với kết quả gốc (p<0. 01).
Kết luận:
Quy trình kỹ thuật và chất lượng xét nghiệm khi sử dụng bộ kit Generique đã được đánh giá với kết quả tốt bởi 2 hệ thống kiểm tra chất lượng quốc tế, do đó có thể ứng dụng rộng rãi và triển khai phục vụ cho công tác theo dõi điều trị của bệnh nhân. Việc ứng dụng trong chẩn đoán sớm nhiễm HIV cho trẻ (< 18 tháng tuổi) có khả quan cao vì sự tương đồng kết quả 100% giữa kỹ thuật định lượng HIV-1 RNA so với kỹ thuật PCR “tổ” phát hiện DNA bộ gen HIV-1 trong tế bào bạch cầu đơn nhân trong máu ngoại vi. Giá thành xét nghiệm thấp so với các kỹ thuật định lượng khác.
Một số kết quả minh họa :
http://hiv.com.vn/Upload/23651.jpg
http://hiv.com.vn/Upload/23652.jpg
Trích dẫn:
Gửi bởi noiloconmai
PCR (Polymerase Chain Reaction - Phản ứng chuỗi trùng phân) là một kỹ thuật then chốt trong di truyền học phân tử cho phép phân tích bất kỳ một đoạn ngắn nào của chuỗi ADN (hay của chuỗi ARN) mà không phải nhân dòng vô tính đoạn ADN đó. PCR được sử dụng để tái tạo (khuếch đại) những đoạn ADN chọn lọc. Trước đây, việc khuếch đại này được thực hiện nhờ những vi khuẩn và phải mất hàng tuần. Nhưng giờ đây với kỹ thuật PCR được thực hiện trong các ống nghiệm thì chỉ mất một vài giờ. PCR hiệu quả cao đến nỗi có thể tạo ra vô số bản sao của ADN. Ngoài ra, PCR sử dụng chính những phân tử mà thiên nhiên sử dụng để sao chép ADN:
- Hai "phân tử mồi" để đánh dấu vị trí bắt đầu và kết thúc của chuỗi ADN cần sao chép.
- Một enzym có tên là polymerase (enzyme đồng phân hóa) chạy dọc theo đoạn ADN đó, đọc mã của ADN và lắp ráp nên một bản sao của ADN.
- Rất nhiều khối bazơ mà polymerase sử dụng để xây nên bản sao của ADN.
Một ưu điểm khác của PCR trong chẩn đoán bệnh nhiễm khuẩn là PCR chẳng những có thể phát hiện được tác nhân vi sinh vật gây bệnh trực tiếp trong bệnh phẩm mà còn có thể phân loại type di truyền của các vi sinh vật này, không cần phải nuôi cấy được vi khuẩn. Ðây là một đóng góp rất lớn trong nghiên cứu dịch tễ học tìm hiểu mối liên quan của các tác nhân gây bệnh trong cộng đồng. Một chứng minh hết sức nỗi tiếng trong ứng dụng này là trường hợp "nha sĩ Florida" (Florida dentist) : Nhờ có PCR mà người ta đã xác định được 3 bệnh nhân khám điều trị răng đã bị nhiễm HIV từ một nguồn gốc là vị nha sĩ nọ bị nhiễm HIV.
Do thử nghiệm PCR quá nhạy cảm, nên khi áp dụng trong chẩn đoán, một vấn đề rất quan trọng cần phải lưu tâm, đó là hiện tượng dương tính giả, chủ yếu là do mẫu thử bị nhiễm bởi các sản phẩm PCR trước đó. Chỉ cần mẫu thử bị nhiễm một hoặc vài mảnh sản phẩm PCR thì các mảnh này sẽ được khuếch đại và mẫu cho kết quả dương nhưng là dương giả. Đợi 12 tuần là cần thiết. Việc gì mà vội hả bạn ?
Hiện nay xét nghiệm DNA_ PCR(Chuỗi phản ứng polymerase) là một trong những xét nghiệm có độ chính xác cao nhất tuy nhiên thời gian chính xác để thực hiện xét nghiệm này từ ngày có hanh vi nguy cơ vẫn còn gây nhiều tranh cãi (theo các tài liệu nước ngoài là 28 ngày,một số tài liệu của VN là 10 ngày hoặc theo một số bác sĩ của viện Pasteur là từ 3-7 ngày). Đây là một xét nghiệm khá tốn kém và quy trình khá phức tạp( dựa trên kĩ thuật nhiệt) nên thường chỉ dùng cho trẻ em(dưới 18 tháng tuổi) để phát hiện bản sao bộ ADN của HIV.Như Hiện tại theo mình biết viện Pasteur TPHCM dùng phương pháp này để xét nghiệm cho trẻ em dưới 18 tháng tuổi hoặc dùng đo nồng độ vi rút cho người có HIV.Viện Pasteur TPHCM nếu xét nghiệm PCR âm tính ( dưới ngưỡng cửa phát hiện) thì Bác Sĩ vẫn khuyên sau 12 tuần xét nghiệm lại.
pp này cũng chỉ tương đối chính xác . nhưng rất tốn kém về thời gian chờ đợi. theo quan điểm của mình bạn vẫn nên đợi 4 tuần làm xn combo
Em cảm ơn các anh chị đã tư vấn.
theo bác sĩ tư vấn đây là một phương pháp có độ chính xác cao, tuy nhiên do phải thu thập đủ mẫu mới làm xét nghiệm nên thời gian chờ đợi lâu
hiện nay chỉ 1 mẫu người ta cũng xn không cần đợi đủ mẫu như bạn nói. tuy nhiên phương pháp này cũng chỉ tương đối chính xác thôi. theo nhiều bạn đến tư vấn chỗ mình có 1 bs ở 1 trung tâm lớn của HN lúc nào cũng khuyên dùng pp này dù ở bất kì thời điểm nào kể cả khi dùng pep.các bạn thành viên nên chú ý để khỏi tốn tiền và không mang lại hiệu quảTrích dẫn:
Gửi bởi Donghpcc90
Nhưng theo mình nghĩ đây là phương pháp có độ chính xác cao, nếu dưới ngưỡng phát hiện thì có thể yên tâm đến 99% có điều nó đắt thôi
Trích dẫn:
Gửi bởi Donghpcc90
Hiện nay có rất nhiều anh chị em dù có HIV ,có kháng thể kháng HIV.Nhưng xét nghiệm nồng độ vi rút,vẫn dưới ngưỡng cửa phát hiện đấy.Cho nên phương pháp PCR, hiện tại Pasteur chỉ dùng cho trẻ em dưới 18 tháng tuổi và dành đo nồng độ vi rút cho người có HIV.
Nói chung phương pháp PCR không được khuyến khích.
Tôi nói cho mà nghe nhé, Nếu NCH điều trị ARV khi dùng PP này làm định lượng Virut dưới ngưỡng phát hiện không có nghĩa là người đó không nhiễm. Lý do dưới ngưỡng virut là do ARV nhốt HIV hoàn toàn theo thời gian điều trị ARV, nhưng XN HIV vẫn DT.Trích dẫn:
Gửi bởi Donghpcc90