Trích dẫn Gửi bởi noiloconmai Xem bài viết
Theo một số thông tin trên mạng, thì xét nghiệm H theo pp PCR có thể phát hiện sớm H từ 14-21 ngày sau nguy cơ. Em xin hỏi các anh chị thông tin có chính xác không và nơi nào thực hiện đc loại xét nghiệm này. Cảm ơn các anh chị.
KỸ THUẬT REAL-TIME PCR
TRONG ĐỊNH LƯỢNG HIV-1 RNA

Trần Chí Thành, Trần Tôn, Trương Thị Xuân Liên
Viện Pasteur thành phố Hồ Chí Minh
Tóm tắt

Định lượng vi rút HIV trong máu là một thông số quan trọng trong chỉ định và theo dõi điều trị cũng như trong chẩn đoán sớm nhiễm HIV ở trẻ sơ sinh.
Trên thị trường đã có nhiều bộ sinh phẩm dùng để xác định số lượng vi rút HIV trong máu. Tuy nhiên việc sử dụng còn tương đối hạn chế nhất là ở các nước đang phát triển do giá thành cao và một số sinh phẩm chỉ có hiệu suất tốt đối với HIV-1 týp B lưu hành chính ở châu âu và Bắc Mỹy4 ANRS Cơ quan quốc gia nghiên cứu về Sida và các vi rút viêm gan của Cộng Hòa Pháp (ANRS) đã nghiên cứu và phát triển bộ kit Generique với giá thành thấp do sử dụng kỹ thuật real-time PCR và có hiệu suất cao với hầu hết các thứ týp di truyền của HIV-1 do thiết kế các mồi và mẫu dò trên vùng gen LTR (Long Terminal Repeats) có tính bảo tồn cao giữa các thứ týp di truyền của HIV-1.
Mục tiêu:

Nghiên cứu triển khai và đánh giá khả năng sử dụng bộ kit Generique trong định lượng HIV-1 tại phòng xét nghiệm HIV/AIDS của Viện Pasteur TP. HCM nhằm phục vụ chẩn đoán theo dõi số lượng vi rút HIV-1 trong máu cho bệnh nhân nhiễm HIV trong điều trị bằng ARV và chẩn đoán sớm nhiễm HIV cho trẻ (<18 tháng tuổi) có mẹ bị nhiễm HIV.
Vật liệu và phương pháp:

114 mẫu máu trẻ (<18 tháng tuổi) bao gồm 58 mẫu có HIV-1 DNA dương tính và 56 mẫu âm tính HIV-1 DNA.
10 mẫu huyết tương chuẩn của tổ chức ANRS (Pháp) và 20 mẫu huyết tương chuẩn của tổ chức NIH (Hoa Kỳ) dùng để kiểm tra chất lượng từ bên ngoài (External Quality Assurance)
Tất cả các mẫu được tiến hành định lượng HIV-1 RNA bằng bộ kit Generique và theo đúng quy trình chuẩn do bộ kit hướng dẫn và được thực hiện trên hệ thống máy realtime PCR ABI 7500.
Kết quả:

Tất cả 56 mẫu âm tính HIV-1 DNA thì không phát hiện HIV-1 RNA trong huyết tương bằng kỹ thuật realtime.
Tất cả 58 mẫu dương tính HIV-1 DNA thì đã phát hiện và xác định được số lượng HIV-1 RNA trong huyết tương.
Kết quả phản hồi từ 2 tổ chức ANRS và NIH về kết quả định lượng các bộ mẫu huyết thanh chuẩn, các giá trị về số lượng bản mẫu HIV-1 RNA (giá trị tuyệt đối, giá trị log) đều không khác biệt với kết quả gốc (p<0. 01).
Kết luận:

Quy trình kỹ thuật và chất lượng xét nghiệm khi sử dụng bộ kit Generique đã được đánh giá với kết quả tốt bởi 2 hệ thống kiểm tra chất lượng quốc tế, do đó có thể ứng dụng rộng rãi và triển khai phục vụ cho công tác theo dõi điều trị của bệnh nhân. Việc ứng dụng trong chẩn đoán sớm nhiễm HIV cho trẻ (< 18 tháng tuổi) có khả quan cao vì sự tương đồng kết quả 100% giữa kỹ thuật định lượng HIV-1 RNA so với kỹ thuật PCR “tổ” phát hiện DNA bộ gen HIV-1 trong tế bào bạch cầu đơn nhân trong máu ngoại vi. Giá thành xét nghiệm thấp so với các kỹ thuật định lượng khác.


Một số kết quả minh họa :