5.4. Các ghi chú:
* Sau mỗi ngày kim hút nên được tháo khỏi lọ nhựa đựng hoá chất, rửa sạch bằng nước cất và để khô.
* Quy trình kỹ thuật có thể thay đổi tuỳ theo hướng dẫn của nhà sản suất bộ hoá chất.
6. Nhận định kết quả:
* Khảo sát dưới kính lúp, quan sát sự hình thành các đám kết cụm nổi trên vòng thử nghiệm ngay sau khi đủ thời gian lắc.
Quan sát ngưng kết
Đọc kết quả
Ghi nhận
Kết cụm to và vừa phải
Dương tính
Có phản ứng
Kết cụm nhỏ
Dương tính yếu
Phản ứng yếu
Không ngưng kết
Am tính
Không phản ứng
* Đối với test định lượng: Hiệu giá huyết thanh được ghi nhận tại giếng có độ pha loãng lớn nhất còn cho kết quả ngưng kết
7. Các yếu tố liên quan:
* Các kỹ thuật giống như Cardiolipin không đặc hiệu với bệnh giang mai, vì vậy khi mẫu có kết quả dương tính cần thiết phải thử lại với các kỹ thuật khác như TPHA, FTA-Abs.
* Tuy nhiên khi RPR âm tính cũng không loại trừ khả năng đã mắc bệnh giang mai.
* Các dương tính giả thường gặp trong các bệnh nhiễm đơn nhân, bệnh phổi do virus và Toxoplasma, có thai và bệnh tự miễn.
KỸ THUẬT TPHA TRONG CHẨN ĐOÁN GIANG MAI
1. Nguyên tắc:
TPHA là kỹ thuật ngưng kết hồng cầu gián tiếp đủ nhạy cảm và đặc hiệu để phát hiện kháng thể kháng Treponema pallidum.
Hồng cầu được gắn kháng nguyên là thành phần của Treponema pallidum gây bệnh (chủng Nichol’s). Phản ứng ngưng kết hồng cầu xảy ra khi huyết thanh người bệnh có chứa kháng thể kháng Treponema pallidum, sự ngưng kết được nhìn thấy bằng hình dạng của một “bánh” hồng cầu trong đĩa vi lượng.
2. Hoá chất:
Bộ hoá chất bao gồm:
* TPHA Test cell (chứa HC có gắn kháng nguyên)
* TPHA Control cell (chứa HC không gắn kháng nguyên)
* Diluent (dung dịch pha loãng)
* Positive control (chứng dương, hiệu giá 1:2560)
* Negative control (chứng âm)
Các lọ sinh phẩm và hoá chất lưu giữ ở nhiệt độ từ 2-8oC ở tư thể để đứng .
Tất cả hoá chất sinh phẩm sử dụng ngay không phải pha chế. Test và Control cell nên lắc trộn nhẹ nhàng và thật kỹ trước khi sử dụng. Để ở nhiệt độ phòng trước khi dùng.
Các dụng cụ cần thiết chuẩn bị:
* Micropipette các thể tích 10ml, 25ml, 75ml, 190ml.
* Đĩa vi lượng có giếng đáy tròn.
3. Bệnh phẩm:
* Huyết thanh không nhiễm khuẩn, không bị tan huyết.
* Mẫu có thể giữ 24 giờ ở nhiệt độ 2-8oC
* Có thể giữ một thời gian dài ở nhiệt độ âm 20oC.
4. Quy trình kỹ thuật:
4.1. Kỹ thuật định tính: clas��oo����e='margin-bottom:4.0pt;text-align:justify;text-indent: 21.3pt'>KỸ THUẬT TPHA TRONG CHẨN ĐOÁN GIANG MAI
1. Nguyên tắc:
TPHA là kỹ thuật ngưng kết hồng cầu gián tiếp đủ nhạy cảm và đặc hiệu để phát hiện kháng thể kháng Treponema pallidum.
Hồng cầu được gắn kháng nguyên là thành phần của Treponema pallidum gây bệnh (chủng Nichol’s). Phản ứng ngưng kết hồng cầu xảy ra khi huyết thanh người bệnh có chứa kháng thể kháng Treponema pallidum, sự ngưng kết được nhìn thấy bằng hình dạng của một “bánh” hồng cầu trong đĩa vi lượng.
2. Hoá chất:
Bộ hoá chất bao gồm:
* TPHA Test cell (chứa HC có gắn kháng nguyên)
* TPHA Control cell (chứa HC không gắn kháng nguyên)
* Diluent (dung dịch pha loãng)
* Positive control (chứng dương, hiệu giá 1:2560)
* Negative control (chứng âm)
Các lọ sinh phẩm và hoá chất lưu giữ ở nhiệt độ từ 2-8oC ở tư thể để đứng .
Tất cả hoá chất sinh phẩm sử dụng ngay không phải pha chế. Test và Control cell nên lắc trộn nhẹ nhàng và thật kỹ trước khi sử dụng. Để ở nhiệt độ phòng trước khi dùng.
Các dụng cụ cần thiết chuẩn bị:
* Micropipette các thể tích 10ml, 25ml, 75ml, 190ml.
* Đĩa vi lượng có giếng đáy tròn.
3. Bệnh phẩm:
* Huyết thanh không nhiễm khuẩn, không bị tan huyết.
* Mẫu có thể giữ 24 giờ ở nhiệt độ 2-8oC
* Có thể giữ một thời gian dài ở nhiệt độ âm 20oC.
4. Quy trình kỹ thuật:
4.1. Kỹ thuật định tính:
